方法
1.準(zhǔn)備感興趣的目標(biāo)細(xì)胞。
2.表面染色后的細(xì)胞表面抗原。表面標(biāo)記的選擇取決于實(shí)驗問題。在不同類型的細(xì)胞的表型標(biāo)記，建3.議請查看相應(yīng)的bestphenotyping標(biāo)記圖：小鼠或人。
4.zui后一次洗滌后，加入固定液100μ雖然渦流管和潛伏在黑暗中在室溫下20分鐘修復(fù)細(xì)胞。
5.添加1毫升每管通透性緩沖液，離心5分鐘，吸出上清液。
6.重復(fù)步驟4。
7.懸浮細(xì)胞的通透性的緩沖區(qū)100μL和潛伏在黑暗中在室溫下5分鐘。
8.用20μl通透性緩沖抗細(xì)胞因子的單克隆抗體熒光標(biāo)記的*濃度和添加適當(dāng)?shù)墓??；靹?。此?yīng)用程9.序的抗體好的范圍0.5-0.06μ克/ 106細(xì)胞。eBioscience熒光標(biāo)記的抗細(xì)胞因子抗體也可在20μL /測試規(guī)格。如果使用這些試劑，加入20μL預(yù)滴定抗體相應(yīng)的管。
10.潛伏在黑暗中在室溫下20分鐘。
11.增加通透性緩沖液1 mL，離心5分鐘，吸出上清液。
12.懸浮細(xì)胞顆粒流染色緩沖液0.5毫升。
13.使用流式細(xì)胞儀分析。
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